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荧光显微镜放大倍数
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北京长恒荣创科技

时间 : 2021-02-01 15:07 浏览量 : 72

    荧光显微镜是指将紫外线作为光源,使其照射在样品上,并使得样品发光,从而实现观察的一种显微镜,用于生物领域中研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等的工具。

    荧光显微镜放大倍数与分辨率

    荧光显微镜有两个关键的概念,其一是放大倍数,其二是分辨率。

    荧光显微镜放大倍数

    在荧光显微镜的观察应用中,为了获得良好的结果,用户需要对显微镜的放大倍数有一定的了解,显微镜的放大倍数就是指在新萄京3522vip在显微镜下观察一个样品时,成像之后比原本放大了多少。

    分辨率

    而在荧光显微镜中,分辨率刚好与其相反,实际意义上的分辨率指的是样品成像之后,图片能够呈现出样品的多少细节,这可能是主观的,在技术层面上,分辨率受到光的折射特性的限制。

    荧光显微镜放大倍数与分辨率

    荧光显微镜还有一个概念是极限分辨率,它指典型的落射荧光照明复合显微镜无法分辨或区分距离小于200nm的两个物体。此外,因为整个样品被同时照射,所以样品中所有聚焦和离焦的光线都被检测到。这些限制意味着,根据物镜中的镜片,可能能够确定一个细胞中的两个不同颜色的探针,但是如果没有很多对照、单像素分析和计算,就无法分辨它们之间的空间关系。

    荧光显微放大倍数与标尺之间的对应关系

    50x标尺每一格代表20μm

    100x标尺每一格代表10μm

    200x标尺每一格代表5μm

    400x标尺每一格代表2.5μm

    500x标尺每一格代表2μm

    1000x标尺每一格代表1μm

    微镜的物镜放大倍数允许有5%的误差,所以使用前需要校准,步骤是:把物镜测微尺(划分为100小格,0.01mm/格)放在载物台上,然后用相应倍率的物镜和10*刻度目镜(内有0.1mm格值的刻度尺)调焦成象后,进行观察,物镜测微尺与目镜刻度尺重合的格数*0.01/目镜刻度尺的格数即为物镜在此倍率下每个刻度值的实际长度。

    物镜和目镜加在一起标定总放大倍数。用物镜测微尺当试样看,上面有个1mm的尺子,分成100个小格,一个小格是10微米。你用带有目镜测微尺的目镜去量上面标尺的长度,量出来数值,除以1mm真实长度,不就知道放大倍数了么。经常有单位说显微镜要让计量局来计量。其实显微镜是分析仪器,不是强检仪器。有时计量局来人计量,主要就是干这个活,计量你的放大倍数是不是在误差之内。


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